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廈門(mén)儀邁環(huán)?？萍加邢薰?吳小姐

在細(xì)胞房摸爬滾打的日子，很多人都經(jīng)歷過(guò)這些瞬間：

· 剛收到的DMSO，怎么成了硬邦邦的冰塊？

· 昂貴的胎牛血清，解凍后底部怎么有一層沉淀？

· 這些異常到底是正?，F(xiàn)象，還是試劑出了問(wèn)題？是不是又要重新買(mǎi)試劑了？

別慌！這一期「細(xì)胞培養(yǎng)精進(jìn)社」，我們就來(lái)聊聊細(xì)胞培養(yǎng)中兩個(gè)高頻出現(xiàn)、也最容易讓人誤判的實(shí)驗(yàn)室 issue——DMSO結(jié)冰和血清沉淀?？赐赀@篇，你就能少一點(diǎn)慌張，多一點(diǎn)篤定。

Issue 1：DMSO結(jié)冰？這是它的“物理魔法"

很多新手（甚至有些老手）第一次遇到低溫運(yùn)輸后的DMSO時(shí)，都會(huì)以為買(mǎi)到了劣質(zhì)品。真相是：DMSO的熔點(diǎn)在 16-19°C 之間。如果運(yùn)輸或儲(chǔ)存環(huán)境溫度較低，它就會(huì)像水一樣結(jié)晶凝固。這是正常的物理現(xiàn)象，并不是變質(zhì)！

細(xì)胞精進(jìn)社建議：

·千萬(wàn)不要用火烤、開(kāi)水燙，或者用高溫水浴劇烈加熱！這不僅效率低，還可能對(duì)試劑造成不良影響。

·只需將DMSO置于室溫下自然解凍，或者放入溫水中溫育即可。凍融過(guò)程并不會(huì)影響DMSO的性質(zhì)與功能。

Issue 2：血清有沉淀？先別急著扔進(jìn)垃圾桶！

“師妹，血清很貴知道吧！"

這句來(lái)自師兄的口頭禪，是不是讓你每次看到異常都心驚膽戰(zhàn)？

尤其是當(dāng)胎牛血清解凍后，發(fā)現(xiàn)瓶底多了一層沉淀，很多人的第一反應(yīng)就是：血清壞了？還能不能用？要不要重新買(mǎi)一瓶？

其實(shí)，大多數(shù)情況下，血清出現(xiàn)沉淀是正常現(xiàn)象。

血清中含有脂蛋白和纖維蛋白原，在融化過(guò)程中（尤其是溫度較低或融化速度不均時(shí)），這些物質(zhì)會(huì)產(chǎn)生沉淀。這一般不會(huì)影響血清的性能。

細(xì)胞精進(jìn)社建議：

· 在 400 x g 條件下離心去除沉淀，就可以正常使用了。

· 重點(diǎn)提醒：不建議直接過(guò)濾去除沉淀！直接過(guò)濾可能會(huì)導(dǎo)致血清中關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，得不償失。

血清正確“打開(kāi)（解凍）方式"：

1.控溫解凍：應(yīng)在 2-8°C 過(guò)夜解凍以避免降解，或者在室溫條件下，定期輕輕搖動(dòng)使組分重懸。溫度切勿超過(guò) 37°C，否則會(huì)加速關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分降解，影響血清性能。

2.定期攪動(dòng)：解凍過(guò)程中定期輕輕攪動(dòng)血清瓶，可以減少血清解凍過(guò)程中可能形成的鹽和蛋白質(zhì)梯度，讓營(yíng)養(yǎng)成分更均勻。解凍的血清在加入細(xì)胞培養(yǎng)基前應(yīng)該混合均勻。

3.分裝儲(chǔ)存：由于反復(fù)凍存會(huì)嚴(yán)重影響血清品質(zhì)，建議將解凍的血清分裝成單次使用量，并凍存于-20°C。如果儲(chǔ)存于2-8°C，應(yīng)該在2-4周使用。

細(xì)胞培養(yǎng)里，真正拉開(kāi)差距的，往往不是復(fù)雜操作，而是這些最基礎(chǔ)、最容易被忽視的試劑使用細(xì)節(jié)。

把 DMSO 和血清這些“基礎(chǔ)動(dòng)作"做對(duì)，很多后面的麻煩，都會(huì)少很多。

如果你也正在準(zhǔn)備新一輪細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，不妨把這份避坑指南先收藏起來(lái)。

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